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蛋白质组分析

产品介绍

外泌体(exosome),指直径在40-150nm的盘状囊泡。外泌体内部包裹了蛋白质、mRNAmicroRNA等物质目前基于质谱的蛋白质组学是研究外泌体不可或缺的一项技术

产品特点

实验室采用Thermo Scientific Q Exactive plus 组合型四吸杆orbitrap质谱仪进行外泌体蛋白质质谱检测。根据客户需求本公司可提供不同的检测方法:

一种是非标定量法(Label-Free,该方法是近年来重要的蛋白定量方法,该技术无需昂贵的同位素标签做内标,提高了低丰度蛋白质的检测效率和蛋白质定量的准确性。非标定量法是通过比较质谱分析次数或质谱峰强度,分析不同来源样品蛋白的数量变化,认为肽段在质谱中被捕获检测的频率与其在混合物中的丰度成正相关,因此蛋白质被质谱检测的计数反映了蛋白质的丰度,通过适当的数学公式可以将质谱检测计数与蛋白质的量联系起来从而对蛋白质进行定量。

另一种是标记定量法(iTRAQ/TMT,iTRAQ/TMT试剂由三部分组成:报告基团、平衡基团和反应基团。反应基团形成2-10种等质量同位素标签。iTRAQ/TMT试剂标记酶解后的肽段,可与氨基酸N端及侧链的伯胺基团发生反应。在一级谱图中,来自于不同样本的同一肽段,标记后表现为相同的质荷比。在二级谱图中,报告基团、平衡基团和反应基团之间的键断裂,带不同同位素标签的同一肽段产生质量不同的报告离子,根据报告离子的丰度可获得样本间相同肽段的定量信息,再经过软件处理得到蛋白质的定量信息。

操作说明

1、样本量

类型

要求

血清、血浆样本

1ml

细胞培养上清、尿液等体液样本

50ml

外泌体

粒子数≥1011/mL,体积≥200 uL

200 ug总蛋白,浓度≥0.5 ug/ul

注:为保证样本检测得准确性,本公司不建议客户直接提供外泌体蛋白液

2、样本运输及保存

样本应-80℃低温保存,样品保存期间避免反复冻融;样本装于离心管中,封口膜封好后,干冰运输,并确保收货时干冰有剩余。样品邮寄提前跟公司联系并告知快递单号。样寄送必须随附送样单(送样单可通过当地经销商或公司售前技术支持索取),送样单尽量填写完整、清晰,仔细核对确保填写信息与样本信息完全一致,并将填好的送样单发送到公司邮箱info@rengenbio.com

相关产品信息

实验室收到样本后6-7周完成检测及数据分析(单次送样量大于10个可能会出现延迟),数据分析包括差异蛋白筛选、差异蛋白归类(GO分析,KEGG分析等)。如果客户需要高级数据分析,费用根据分析内容另行收取。

产品数据

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